Hei ada! Sebagai pembekal penghubung peptida untuk ADC (antibodi - konjugasi dadah), saya telah mendapat banyak soalan akhir -akhir ini tentang cara merancang penghubung peptida untuk mengawal kadar pelepasan muatan di ADC. Jadi, saya fikir saya akan berkongsi beberapa pandangan mengenai topik ini.
Mula -mula, mari kita faham dengan cepat ADC. ADC pada dasarnya adalah sejenis terapi yang disasarkan yang menggabungkan kekhususan antibodi monoklonal dengan sitotoksisiti ubat molekul kecil. Penyambung peptida memainkan peranan penting di sini. Ia menghubungkan antibodi dan muatan (ubat sitotoksik), dan reka bentuknya sangat mempengaruhi kapan dan bagaimana muatan dikeluarkan di dalam sel sasaran.
Faktor yang mempengaruhi kadar pelepasan muatan
Kebolehkerjaan
Salah satu faktor yang paling penting ialah kebolehkerjaan penghubung peptida. Kami mahu penghubung untuk kekal utuh semasa peredaran di aliran darah tetapi pecah apabila ia mencapai sel sasaran. Terdapat dua jenis utama penghubung yang boleh dibersihkan: enzim - cleavable dan pH - cleavable.
Enzim - penghubung yang boleh dibersihkan direka untuk diiktiraf dan dipotong oleh enzim tertentu yang sangat dinyatakan dalam sel -sel tumor. Sebagai contoh, Cathepsin B adalah enzim yang sering berakhir - dinyatakan dalam banyak sel kanser. Urutan peptida seperti Val - CIT biasanya digunakan dalam penghubung kerana mereka boleh dipotong oleh Cathepsin B. Apabila ADC memasuki sel sasaran dan dibawa ke lysosome, cathepsin B memotong ikatan Val - CIT, melepaskan muatan. KamiFMOC - VAL - CIT - PAB - OHadalah contoh hebat dari penghubung enzim - cleavable. Ia mengandungi urutan Val - CIT dan boleh dimasukkan dengan mudah ke dalam reka bentuk ADC.
PH - Pautan yang boleh dibersihkan, sebaliknya, memecah persekitaran berasid endosom atau lisosom. Ini kerana ikatan kimia dalam penghubung ini sensitif terhadap pH yang rendah. Sebagai contoh, beberapa penghubung berasaskan hidrazon stabil pada pH fisiologi (sekitar 7.4) tetapi hidrolisis pada pH yang lebih rendah (sekitar 5 - 6) yang terdapat di dalam petak sel.
Hydrophobicity
Hidrofobisiti penghubung peptida juga memberi kesan kepada kadar pelepasan. Penyambung yang lebih hidrofobik boleh menjejaskan kelarutan ADC dalam aliran darah. Jika penghubung terlalu hidrofobik, ADC mungkin agregat, yang boleh menyebabkan pelepasan dari badan sebelum mencapai sasaran. Sebaliknya, penghubung yang sangat hidrofilik mungkin menyebabkan muatan dikeluarkan terlalu awal dalam peredaran. Kita perlu mencari keseimbangan.
Kita boleh mengubah suai hidrofobisiti penghubung dengan memilih asid amino yang berbeza. Asid amino seperti leucine dan isoleucine lebih hidrofobik, manakala serine dan threonine lebih hidrofilik. Dengan berhati -hati memilih dan mengatur asid amino ini, kita boleh dengan baik - tentukan hidrofobisiti penghubung.
Panjang Linker
Panjang penyambung peptida juga penting. Penyambung yang lebih pendek mungkin menyekat pergerakan muatan dan antibodi, yang boleh menjejaskan pengikatan ADC kepada antigen sasaran. Walau bagaimanapun, penghubung yang lebih panjang memberikan lebih banyak fleksibiliti tetapi mungkin juga meningkatkan peluang belahan bukan tertentu atau pelepasan pramatang muatan.
Secara umum, penghubung dengan 3 - 10 asid amino biasanya digunakan. Tetapi panjang optimum bergantung kepada antibodi tertentu, muatan, dan sasaran antigen. Kami mendapati bahawa bagi sesetengah ADC yang mensasarkan beberapa jenis sel kanser, penghubung dengan 5 - 7 asid amino berfungsi dengan baik dari segi kestabilan dalam edaran dan pelepasan muatan yang cekap pada sasaran.
Strategi reka bentuk
Reka bentuk rasional
Reka bentuk rasional melibatkan penggunaan pengetahuan kita tentang biologi sel sasaran, sifat antibodi dan muatan, dan ciri -ciri urutan peptida yang berbeza. Kami mulakan dengan mengenal pasti enzim atau keadaan pH yang unik kepada sel sasaran. Kemudian, kami memilih motif yang boleh dibaca yang sesuai untuk penghubung.
Sebagai contoh, jika kita tahu bahawa tumor tertentu lebih - menyatakan protease tertentu, kita boleh merancang penghubung dengan urutan yang diiktiraf oleh protease itu. Kami juga menganggap hidrofobisiti dan panjang penghubung berdasarkan kelarutan dan keperluan mengikat ADC.
TINGGI - Pemeriksaan throughput
Pendekatan lain adalah pemeriksaan throughput yang tinggi. Kami boleh mensintesis perpustakaan besar yang berbeza dengan penghubung peptida dan menguji mereka secara in vitro dan dalam vivo. Ini membolehkan kami dengan cepat mengenal pasti penghubung yang memberikan prestasi terbaik dari segi kadar pelepasan muatan, kestabilan, dan keberkesanan.
Kita boleh menggunakan teknik seperti paparan phage atau peptida microarrays untuk menyaring ribuan penghubung sekaligus. Dengan menganalisis hasilnya, kami dapat mencari reka bentuk penghubung yang optimum untuk aplikasi ADC tertentu.
Contoh penghubung kami
Mari kita lihat beberapa penghubung peptida popular kami untuk ADC. KamiCit - val - cit - pabc - ibuadalah penghubung yang kuat - konjugasi muatan. Urutan val - CIT menjadikannya enzim - boleh dibersihkan, dan kumpulan acetylene boleh digunakan untuk konjugasi kepada antibodi. Kombinasi muatan penghubung ini telah menunjukkan potensi yang besar dalam kajian pra - klinikal untuk mensasarkan pelbagai jenis kanser.
Yang lain adalahMC - Val - CIT - PAB - PNP. Ia mengandungi motif Val - CIT dan direka untuk pelepasan muatan yang cekap. Kumpulan MC menyediakan sambungan yang stabil kepada antibodi, dan Spacer PAB membantu dalam pembebasan muatan yang betul.
Kesimpulan
Merancang penghubung peptida untuk mengawal kadar pelepasan muatan dalam ADCS adalah proses yang kompleks tetapi memberi ganjaran. Dengan mempertimbangkan faktor -faktor seperti kebolehlaksanaan, hidrofobisiti, dan panjang penghubung, dan menggunakan strategi seperti reka bentuk rasional dan pemeriksaan throughput yang tinggi, kami boleh membuat penghubung yang mengoptimumkan prestasi ADC.
Jika anda sedang menjalankan pembangunan ADC dan berminat dengan penghubung peptida kami, kami ingin bersembang. Sama ada anda memerlukan bantuan dengan reka bentuk penghubung, ingin mengetahui lebih lanjut mengenai produk kami, atau bersedia untuk membuat pesanan, jangan teragak -agak untuk menjangkau. Kami berada di sini untuk menyokong anda dalam perjalanan anda untuk membangunkan terapi ADC yang berkesan.
Rujukan
- Ducry, L., & Stump, B. (2010). Antibodi - Konjugasi Dadah: Menghubungkan muatan sitotoksik kepada antibodi monoklonal. Kimia Bioconjugate, 21 (1), 5 - 13.
- Alley, SC, Okeley, NM, & Senter, PD (2010). Antibodi - Konjugasi Dadah: Penghantaran Dadah yang Ditargetkan untuk Kanser. Pendapat semasa dalam Biologi Kimia, 14 (3), 529 - 537.
- Shen, BQ, et al. (2012). Mengawal lokasi lampiran dadah dalam antibodi - konjugasi dadah. Alam Bioteknologi, 30 (2), 184 - 189.